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植物可溶性糖含量檢測試劑盒
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品牌:原鑫生物
貨號:YX-KR-10256
規(guī)格:60T/50S
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植物可溶性糖含量檢測試劑盒

Plant Soluble Sugar Content Assay Kit


植物可溶性糖含量檢測試劑盒

一、植物可溶性糖含量檢測試劑盒產(chǎn)品描述

糖類物質(zhì)是構(gòu)成植物體重要組成成分之一,不僅是新陳代謝的主要原料和貯存物質(zhì),也可作為轉(zhuǎn)移介質(zhì)、功能分子和調(diào)節(jié)因子等調(diào)控植物的生長和發(fā)育。植物體內(nèi)的可溶性糖主要指能溶于水和乙醇的還原性單糖、寡聚糖及能水解為還原單糖的部分多糖。

糖類在硫酸作用下,脫水生成糠醛或羥甲基糠醛,蒽酮與糠醛或羥甲基糠醛脫水縮合生成藍綠色衍生物,產(chǎn)物在 620 nm 處具有特征吸收峰,通過吸光值的變化即可定量檢測植物可溶性糖的含量。


二、植物可溶性糖含量檢測試劑盒產(chǎn)品內(nèi)容

圖片2.png

圖片3.png


三、植物可溶性糖含量檢測試劑盒產(chǎn)品使用說明

測定過程中所需要的儀器和試劑:可見分光光度計、1 mL 玻璃比色皿(1 cm 光徑)、研缽/勻漿器、可調(diào)式移液器、臺式離心機、恒溫水浴、濃硫酸和蒸餾水。

1.植物可溶性糖的提取(可根據(jù)預(yù)實驗結(jié)果適當(dāng)調(diào)整樣本量)

稱取約 0.1-0.2 g 樣本,加入 1 mL 蒸餾水研磨至勻漿,95℃水浴處理 10 min(密封以防止水分散失),冷卻至室溫后,8000 g 常溫離心 10 min,取上清液于 10 mL 試管中,使用蒸餾水定容至 10 mL,充分混勻即為待測樣本。(注:若烘干物質(zhì)質(zhì)地堅硬,可先研碎后再加入 1 mL 蒸餾水勻漿)

2.測定步驟

①分光光度計預(yù)熱 30 min 以上,調(diào)節(jié)波長至 620 nm,蒸餾水調(diào)零。

②在離心管中依次加入下列試劑:

圖片4.png

吸光值測定:取 1 mL 反應(yīng)液于 1 mL 玻璃比色皿中,測定 620 nm 處吸光值,記為 A 測定、A 標準和 A 空白;計算?A 測定=A 測定-A 空白,?A 標準=A 標準-A 空白。注:空白管只需測定 1-2 次。

標準曲線的建立:以 0.2、0.1、0.05、0.025、0.0125、0.00625 mg/mL 為橫坐標(x),以其對應(yīng)的ΔA 標準為縱坐標(y),繪制標準曲線,得到標準方程 y=kx+b,將 ΔA 測定帶入公式中得到 x(mg/mL)。

3.植物可溶性糖含量計算

①按組織質(zhì)量計算

圖片5.png

圖片6.png

注釋:V 樣:反應(yīng)體系中加入待測樣本的體積,0.2 mL;V 提:提取后總體積,10 mL;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g。


四、植物可溶性糖含量檢測試劑盒注意事項

①若?A 測定超出標準線性范圍,建議適當(dāng)增加樣本量或?qū)⒋郎y樣本適當(dāng)稀釋后再進行測定,計算時相應(yīng)修改;

②濃硫酸具有強腐蝕性,操作時需特別注意:加入濃硫酸時,建議槍頭伸入液面以下緩慢加入,以防止液面沸騰燙傷及樣本碳化,95℃水浴結(jié)束后需冷卻至室溫再打開離心管蓋,以防液體飛濺燒傷;

③為保證結(jié)果準確且避免試劑損失,測定前請仔細閱讀說明書(以實際收到說明書內(nèi)容為準),

確認試劑儲存和準備是否充分,操作步驟是否清楚,且務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本進行預(yù)測定。


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